苯酚硫酸法_总糖含量的测定苯酚硫酸法

苯酚硫酸法的硫酸浓度

%。根据查询相关公开信息显示苯酚硫酸法，苯酚硫酸法需要使用优纯级苯酚硫酸法的浓硫酸水解多糖苯酚硫酸法，优纯级的硫酸浓度为95%，因此苯酚硫酸法的硫酸浓度为95%。苯酚硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，再以比色法测定。

苯酚硫酸法的硫酸浓度通常为浓硫酸。苯酚硫酸法是一种常用的测定多糖和糖原含量的方法。

首先，浓硫酸需达到分析纯度，其纯度需达到95%。这是苯酚-硫酸法试剂制备过程中的重要组成部分。接着，80%的苯酚需要通过加水溶解的方式进行配制，具体步骤为将80克苯酚（为分析纯重蒸馏试剂）加入20克水中，直到完全溶解。此溶液应置于冰箱中并避光长期储存，以保持其稳定性和浓度。

加入5%苯酚 0 mL，摇匀，迅速加入0 mL的浓硫酸（市售即可）。

苯酚-硫酸法注意

1、此法简单、快速、灵敏、重复性好苯酚硫酸法，对每种糖仅制作一条标准曲线，颜色持久。（2）制作标准线宜用相应苯酚硫酸法的标准多糖，如用葡萄糖，应以校正系数0.9校正μg数。（3）对杂多糖，分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算。（4）测定时根据光密度值确定取样的量。

2、苯酚-硫酸法是一种简便、快捷、灵敏且重复性良好的糖类测定方法。每种糖仅需制作一条标准曲线，且颜色持久稳定。在制作标准曲线时，应选用相应的标准多糖进行。例如，若使用葡萄糖作为标准物，需以校正系数0.9校正微克数。

3、首先，浓硫酸需达到分析纯度，其纯度需达到95%。这是苯酚-硫酸法试剂制备过程中的重要组成部分。接着，80%的苯酚需要通过加水溶解的方式进行配制，具体步骤为将80克苯酚（为分析纯重蒸馏试剂）加入20克水中，直到完全溶解。此溶液应置于冰箱中并避光长期储存，以保持其稳定性和浓度。

苯酚硫酸法测多糖显色时间

到20分钟。根据查询相关信息显示，苯酚硫酸法是一种测定多糖含量的方法，其显色时间是指将苯酚硫酸试剂与多糖混合后，显色变化的时间未15至20分钟。

将蒽酮让溶于浓硫酸中做显色剂用。沸水裕3-5分钟，立即用冰水冷却。用紫外测定吸光度。

制备苯酚溶液：根据实验需求，准备一定浓度的苯酚溶液。这一步骤通常是预先完成，确保实验时溶液的稳定性。 显色反应：取适量样本，与硫酸和苯酚溶液按照一定比例混合。此混合液需在水浴中加热，通常温度控制在一定范围内，比如80°C，持续时间则根据样本特性和实验要求设定。

摇匀静置30分钟以后于490nm测吸光度，以0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。

苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10－100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。

你用的是苯酚-硫酸比色法吧？多糖类成分在硫酸作用下水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后和苯酚缩合成有色化合物，用分光光度计在490nm波长处测定其吸光度，根据标准工作曲线计算出多糖的含量。

苯酚硫酸法测多糖空白有颜色吗?

1、在苯酚-硫酸法测定多糖时，空白样品出现颜色，这可能是因为空白中的苯酚被氧化形成了深红色的醌类化合物。 如果空白样品的颜色过深，表明酚的浓度可能过高。通常情况下，酚的浓度应控制在5%左右。 当空白样品颜色较浅时，说明酚的浓度适宜，颜色深浅也可能与实验操作的技术水平有关。

2、如果在进行苯酚-硫酸法测定多糖的实验中发现空白有颜色，这可能是因为空白中的苯酚被氧化形成了醌类化合物，导致颜色变深。苯酚-硫酸法测定多糖的原理是在硫酸的作用下，多糖先被水解成单糖，然后迅速脱水生成糖醛衍生物，与苯酚反应生成橙黄色化合物，最后通过比色法进行测定。

3、苯酚-硫酸法测多糖时空白有颜色：说明你的空白中的苯酚被氧化了深红是醌（苯酚氧化生成）的颜色。颜色过深的话说明你的酚的浓度过大，一般是5%，不是深红色的做的好的时候颜色很浅，颜色深点也有肯能 。

4、空白是粉色可能是硫酸不纯，铁离子超标的缘故，当然超的不多，否则就是紫色了。正常的反应溶液是深棕色。糖越多颜色越深。至于硫酸的滴加方式影响不是很大，只要保证各管的操作方法是一样的即可。这也是分光光度法的关键：即要保持操作条件的一致性。

苯酚硫酸法测多糖计算公式

所以，苯酚硫酸法测多糖的计算公式是C等于（P除 V）乘1000。

多糖含量的测定 粗多糖中的总糖含量使用苯酚-硫酸法进行测定，还原糖用3，5-二硝基水杨酸（DNS）法测定，多糖含量 = 总糖 - 还原糖。

0％苯酚溶液：称取90g苯酚（AR），加蒸馏水10mL溶解，在室温下可保存数月。（2）9％苯酚溶液：取3mL 90％苯酚溶液，加蒸馏水至30mL，现配现用。（3）浓硫酸（比重84）。（4）1％蔗糖标准液：将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重，精确称取000g。

多糖样品含量一般为0ml。苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，再以比色法测定。

苯酚硫酸法测多糖,苯酚硫酸怎么配制

若要一起加入，先配成溶液的话。要先将苯酚溶于（温）水，然后将浓硫酸绶绶倒入。切不可将溶液注入水中。

先配置80%苯酚：80g苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20g水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。

制备苯酚溶液：根据实验需求，准备一定浓度的苯酚溶液。这一步骤通常是预先完成，确保实验时溶液的稳定性。 显色反应：取适量样本，与硫酸和苯酚溶液按照一定比例混合。此混合液需在水浴中加热，通常温度控制在一定范围内，比如80°C，持续时间则根据样本特性和实验要求设定。